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  "abstract": "Introdução: A investigação de anticorpos irregulares é fundamental na imuno-hematologia por permitir a identificação de aloanticorpos clinicamente significativos, contribuindo para a segurança transfusional. Entretanto, algumas amostras apresentam discrepâncias entre metodologias, exigindo testes complementares para esclarecer a natureza da reatividade. Técnicas como adsorção/eluição, tratamento das hemácias com DTT e genotipagem eritrocitária auxiliam na diferenciação entre aloanticorpos, autoanticorpos e reações inespecíficas. Objetivo: Descrever a investigação imuno-hematológica de uma amostra com pesquisa de anticorpos irregulares positiva pela técnica em gel, destacando a aplicação de métodos complementares. Material e métodos: Foi investigada amostra de sangue periférico de paciente submetido à rotina pré-transfusional. Foram realizados pesquisa e identificação de anticorpos irregulares em LISS/Coombs e enzima pela técnica em gel, teste da antiglobulina direta (TAD), autocontrole, pesquisa de anticorpos e autocontrole pela técnica em tubo (4°C, 37°C e antiglobulina humana), pesquisa de anticorpos no eluato, adsorção/eluição com hemácias heterólogas R1R1, R2R2 e rr, painel no soro adsorvido, pesquisa de anticorpos no eluato das hemácias adsorvidas e avaliação com hemácias tratadas com DTT 0,2 M. Na ausência de definição sorológica, realizou-se genotipagem eritrocitária por biologia molecular para pesquisa de antígenos raros. Resultados: A pesquisa de anticorpos irregulares e o painel de identificação foram positivos na técnica em gel. O TAD foi negativo e o autocontrole em gel positivo. Na técnica em tubo, tanto a pesquisa de anticorpos quanto o autocontrole foram negativos em todas as fases. O eluato apresentou resultado negativo. Nos testes complementares, o painel permaneceu positivo apenas no soro adsorvido, enquanto os eluatos das hemácias adsorvidas permaneceram negativos. A reatividade persistiu após tratamento com DTT 0,2 M. A genotipagem revelou os perfis normais. Ao final da investigação, não foram evidenciados aloanticorpos clinicamente significativos. Discussão: A pan-reatividade observada exclusivamente na técnica em gel, associada à negatividade dos testes em tubo, caracteriza perfil de difícil interpretação, compatível com interferências metodológicas, anticorpos de baixa afinidade ou reações inespecíficas. O autocontrole positivo em gel, com TAD negativo, não sustentou sensibilização eritrocitária in vivo. Os testes de adsorção/eluição descartaram anticorpos aderidos às hemácias, enquanto a manutenção da reatividade após tratamento com DTT afastou anticorpos dependentes de estruturas sensíveis ao agente redutor. A genotipagem complementou a investigação ao caracterizar o perfil antigênico eritrocitário, fornecendo informações relevantes para futuras necessidades transfusionais e reforçando a importância da integração entre métodos sorológicos e moleculares. Conclusão: A investigação evidenciou discrepância entre as metodologias em gel e em tubo, sem confirmação de aloanticorpos clinicamente significativos. A utilização de adsorção/eluição, tratamento com DTT e genotipagem eritrocitária foi fundamental para excluir aloimunização e ampliar a caracterização imuno-hematológica do paciente. O caso reforça a importância da investigação laboratorial integrada.",
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