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  "abstract": "Introdução: A classificação das neoplasias de células B maduras por citometria de fluxo requer integração multidimensional de múltiplos marcadores e permanece dependente da experiência do analista, particularmente diante de fenótipos atípicos, sobrepostos ou populações biclonais. Ferramentas automatizadas baseadas em bancos de dados de referência podem aumentar a objetividade e a padronização da interpretação. Avaliamos o desempenho de uma plataforma automatizada incorporada ao Infinicyt 3.0, utilizando apenas os dois primeiros dos cinco tubos do painel EuroFlow, em casos com diagnóstico estabelecido e situações de classificação imunofenotípica desafiadora. Métodos: Foram analisados retrospectivamente 190 casos. O algoritmo compara cada população B com nove categorias diagnósticas, sendo necessária concordância nas oito comparações pareadas (8/8) para classificação; os demais resultados são reportados como não classificáveis (NC). Foram incluídos 130 casos com diagnóstico confirmado por anatomia patológica e/ou estudos citogenéticos/moleculares, 48 com classificação imunofenotípica inconclusiva ou fenótipo atípico e 12 biclonais. O segundo grupo compreendeu neoplasias B CD5−/CD10− não classificáveis (n = 14), neoplasias B CD5+ não características de LLC ou MCL (n = 22) e neoplasias B vilosas com expressão de CD10 (n = 6) ou ausência de CD25 (n = 6). Nos casos confirmados foram avaliados sensibilidade, especificidade, valores preditivos, cobertura e concordância; os demais foram analisados descritivamente. Resultados: Entre os 130 casos confirmados, a plataforma classificou 67 (51,5%), com concordância exata com o diagnóstico de referência em 64/67 (95,5%) e kappa multiclasses de 0,421. A sensibilidade e o VPP foram, respectivamente, 84,6% e 100% para LLC (33/39); 61,5% e 100% para linfoma de Burkitt (8/13); 46,2% e 100% para linfoma do manto (6/13); 33,3% e 100% para HCL (4/12); 25% e 100% para LPL (1/4); 21,7% e 83,3% para linfoma folicular (10/46); e 66,7% e 66,7% para DLBCL CD10+ (2/3). A especificidade foi de 100% para LLC, linfoma do manto, HCL, LPL e Burkitt. Apenas três classificações cruzadas foram observadas: BL→FL, DLBCL CD10+→FL e FL→DLBCL CD10+; todos os demais resultados discordantes corresponderam a NC. Entre os 48 casos com classificação inconclusiva, nove (18,8%) receberam classificação automatizada. A ferramenta classificou 7/22 neoplasias B CD5+ não LLC/não MCL (3 DLBCL CD10−, 2 LPL, 1 MCL e 1 MZL), 1/6 neoplasias B vilosas CD10+ como HCL e 1/6 neoplasias B vilosas CD25− como MZL; todos os 14 casos CD5−/CD10− permaneceram NC. Nos 12 casos biclonais, ambos os clones foram corretamente reconhecidos em dois e pelo menos um clone em sete, predominantemente LLC; três casos permaneceram NC. Conclusão: A classificação automatizada utilizando apenas dois dos cinco tubos do painel EuroFlow apresentou 95,5% de concordância entre os casos classificados, com VPP de 100% para LLC, MCL, HCL, LPL e BL. A elevada frequência de NC, entretanto, limitou a sensibilidade, particularmente para FL, HCL, LPL e MCL. O comportamento conservador do algoritmo, com poucas classificações cruzadas, favorece sua aplicação como ferramenta de suporte e padronização da interpretação, permitindo direcionar casos NC para investigação complementar. Os resultados em fenótipos inconclusivos/atípicos e amostras biclonais sugerem aplicações adicionais que requerem validação específica.",
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