PROTEÔMICA APLICADA À IDENTIFICAÇÃO DE POTENCIAIS BIOMARCADORES DE RECAÍDA NA LEUCEMIA LINFOBLÁSTICA AGUDA HIPERDIPLOIDE
- 1Hospital da Criança de Brasília José de Alencar, Brasília, DF, Brasil
Abstract
Introdução: As Leucemias Linfoides Agudas (LLA) são o principal tipo de câncer em crianças abaixo dos 15 anos de idade, sendo responsáveis por cerca de 25% dos casos de câncer infantil no mundo. As principais formas de diagnóstico da LLA são por meio de técnicas baseadas em biologia molecular, tais como a reação em cadeia por polimerase (PCR) e sequenciamento de nova geração (NGS), associadas a técnicas de imunofenotipagem, como a citometria de fluxo e marcação por imuno-histoquímica. Apesar das altas chances de cura, casos de LLA classificados como de bom prognóstico, como os casos de hiperdiploidia, ainda possuem recaída frequentes, evento que não pode ser completamente previsto pelas metodologias atualmente utilizadas, considerando principalmente a heterogeneidade biológica desses casos. Neste contexto, o presente estudo busca, por meio de estudos proteômicos, a descrição de possíveis marcadores associados aos eventos de recaídas, assim como caracterizar as proteínas presentes nos casos de hiperdiploidia, de forma a revelar alterações funcionais não detectáveis por RNA ou DNA. O estudo proteômico permite classificar mais precisamente biomarcadores circulantes que possam estar relacionados com as alterações fenotípicas observadas, assim como possíveis alterações pós-traducionais que possam levar ao quadro leucêmico, tendo em vista que marcadores proteômicos associados ao risco de recaída permanecem pouco caracterizados. Objetivo: Deseja-se, com esse trabalho, identificar possíveis marcadores que possam estar diretamente relacionados com os casos de hiperdiploidia, assim como identificar marcadores específicos dos casos de recaída, utilizando a proteômica como ferramenta. Metodologia: Amostras de medula de pacientes com LLA com celularidade de pelo menos 80% de blastos foram selecionadas para a extração de proteínas por meio de protocolo do reagente TRIZOL®. Depois de extraídas, as amostras de proteínas passaram por protocolos de digestão com tripsina e dessalinização para eventual corrida de LC-MS/MS. As análises de resultados encontrados nas corridas de LC-MS/MS foram feitas por meio do software FRAGPIPE. Na análise foi realizada a comparação das proteínas encontradas entre os tempos de diagnóstico e recaída. Resultados: Dentre as comparações dos tempos de diagnóstico e recaída, o grupo das Hiperdiploides apresentou 922 proteínas identificadas, sendo 143 delas representadas como diferencialmente expressas, 11 hiper expressas no tempo de diagnóstico, contra 132 hiper expressas no tempo de recaída. Para o tempo de recaída, foram identificadas 28 proteínas exclusivamente expressas nas amostras do grupo, sendo HSPA5, ANXA1 e MYL12B, proteínas associadas a proliferação celular e escape imunológico, as proteínas identificadas com maior relevância. Para o tempo de diagnóstico, 6 proteínas foram identificadas somente nas amostras do tempo de diagnóstico. Dentre as proteínas encontradas estão a SFNX1 e MIF, proteínas estas que estão relacionadas com proliferação celular. Conclusão: O estudo permitiu a identificação de proteínas diferencialmente expressas entre os dois tempos de análise, assim como a identificação de proteínas exclusivas nos tempos de recaída e diagnóstico. As proteínas identificadas posteriormente serão selecionadas como possíveis marcadores de prognóstico e serão alvos de estudos direcionados para melhor definir o seu impacto dentro do contexto das Leucemias Linfoides Agudas.
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TI - PROTEÔMICA APLICADA À IDENTIFICAÇÃO DE POTENCIAIS BIOMARCADORES DE RECAÍDA NA LEUCEMIA LINFOBLÁSTICA AGUDA HIPERDIPLOIDE
AU - Gabriel Borges COPELAND
AU - Agenor Santos JÚNIOR
AU - Ricardo CAMARGO
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PY - 2026
DA - 2026/10/23
JO - Hematology, Transfusion and Cell Therapy
DO - 10.1016/j.htct.2026.107666
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AB - Introdução: As Leucemias Linfoides Agudas (LLA) são o principal tipo de câncer em crianças abaixo dos 15 anos de idade, sendo responsáveis por cerca de 25% dos casos de câncer infantil no mundo. As principais formas de diagnóstico da LLA são por meio de técnicas baseadas em biologia molecular, tais como a reação em cadeia por polimerase (PCR) e sequenciamento de nova geração (NGS), associadas a técnicas de imunofenotipagem, como a citometria de fluxo e marcação por imuno-histoquímica. Apesar das altas chances de cura, casos de LLA classificados como de bom prognóstico, como os casos de hiperdiploidia, ainda possuem recaída frequentes, evento que não pode ser completamente previsto pelas metodologias atualmente utilizadas, considerando principalmente a heterogeneidade biológica desses casos. Neste contexto, o presente estudo busca, por meio de estudos proteômicos, a descrição de possíveis marcadores associados aos eventos de recaídas, assim como caracterizar as proteínas presentes nos casos de hiperdiploidia, de forma a revelar alterações funcionais não detectáveis por RNA ou DNA. O estudo proteômico permite classificar mais precisamente biomarcadores circulantes que possam estar relacionados com as alterações fenotípicas observadas, assim como possíveis alterações pós-traducionais que possam levar ao quadro leucêmico, tendo em vista que marcadores proteômicos associados ao risco de recaída permanecem pouco caracterizados. Objetivo: Deseja-se, com esse trabalho, identificar possíveis marcadores que possam estar diretamente relacionados com os casos de hiperdiploidia, assim como identificar marcadores específicos dos casos de recaída, utilizando a proteômica como ferramenta. Metodologia: Amostras de medula de pacientes com LLA com celularidade de pelo menos 80% de blastos foram selecionadas para a extração de proteínas por meio de protocolo do reagente TRIZOL®. Depois de extraídas, as amostras de proteínas passaram por protocolos de digestão com tripsina e dessalinização para eventual corrida de LC-MS/MS. As análises de resultados encontrados nas corridas de LC-MS/MS foram feitas por meio do software FRAGPIPE. Na análise foi realizada a comparação das proteínas encontradas entre os tempos de diagnóstico e recaída. Resultados: Dentre as comparações dos tempos de diagnóstico e recaída, o grupo das Hiperdiploides apresentou 922 proteínas identificadas, sendo 143 delas representadas como diferencialmente expressas, 11 hiper expressas no tempo de diagnóstico, contra 132 hiper expressas no tempo de recaída. Para o tempo de recaída, foram identificadas 28 proteínas exclusivamente expressas nas amostras do grupo, sendo HSPA5, ANXA1 e MYL12B, proteínas associadas a proliferação celular e escape imunológico, as proteínas identificadas com maior relevância. Para o tempo de diagnóstico, 6 proteínas foram identificadas somente nas amostras do tempo de diagnóstico. Dentre as proteínas encontradas estão a SFNX1 e MIF, proteínas estas que estão relacionadas com proliferação celular. Conclusão: O estudo permitiu a identificação de proteínas diferencialmente expressas entre os dois tempos de análise, assim como a identificação de proteínas exclusivas nos tempos de recaída e diagnóstico. As proteínas identificadas posteriormente serão selecionadas como possíveis marcadores de prognóstico e serão alvos de estudos direcionados para melhor definir o seu impacto dentro do contexto das Leucemias Linfoides Agudas.
SN - 2531-1379
SN - 2531-1387
ER -