CITOMETRIA DE FLUXO MULTIPARAMÉTRICA NO DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL DAS CITOPENIAS REFRATÁRIAS NA INFÂNCIA
- 1Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ), Rio de Janeiro, RJ, Brasil
Abstract
Introdução: Embora a imunofenotipagem de medula óssea (MO) por citometria de fluxo multipamétrica (CFM) seja amplamente usada na investigação de citopenias refratárias, não existem critérios claramente estabelecidos para diagnosticar as neoplasias mielodisplásicas (NMP), que acaba sendo restrita a contagem de blastos. Na pediatria, o problema se torna mais complexo devido a diferenciação com outras categorias como erros inatos da imunidade (EII) e crianças com predisposição germline (PG). Objetivos: Estabelecer potenciais diferenças na imunofenotipagem de MO para o diagnóstico diferencial entre síndromes mielodisplásicas primárias (SMDp), PG, displasias associadas a doenças beningnas (DB), EII e anemia aplástica (AA). Materiais e Métodos: Foram avaliadas por CFM, 91 amostras de MO de 66 pacientes pediátricos com citopenias refratárias e 7 MO controles (Mediana de idade: 9 anos; IQR: 4–14 anos). Utilizou-se protocolo EuroFlow para SMD (5 tubos) com aquisição de 100 mil células/tubo no FACS Canto II (BD Biosciences), analisados no software Infinicyt. Com base na classificação da Organização Mundial da Saúde, os pacientes foram divididos em: SMDp (n = 59), PG (n = 12), DB (n = 9), EII (n = 7) e AA (n = 4). O software SPSS v.27.0 foi usado para análise estatística. Consideramos valor de p < 0,05 como indicativo de significância estatística. Resultados: AA tem níveis significativamente mais baixos de células CD34+totais(0,08%, 0,04-0,75%,),linfóides e mielóides, enquanto nos EII, há redução apenas das CD34+ mielóides (0,69%, 0,40-0,94%). Nas AA, há grande aumento no percentual de linfócitos totais (64,0%, 33,5-90,8%), T e NK, maiores que todas as categorias diagnósticas, e por conseguinte diminuição intensa de todas as séries. Na SMDp, os linfócitos totais (30.0%,19.3-37.0%), T, NK estão aumentados (em níveis inferiores aos de AA). Os mastócitos estão elevados na SMDp (0.0130%, 0,0048-0.0730%) e nas DB (0.0150%, 0.0034-0.0445%). Houve bloqueio maturativo na linhagem neutrofílica com redução significativa de células CD10+ em todas as categorias, exceto nas AA, que tem poucos neutrófilos, que são 100% maduros. Entretanto, na SMDp os neutrófilos têm menor MFI CD33 e CD35, enquanto nos casos de PG só a MFI CD35 é reduzida e nas DB, a expressão de CD35 e CD33 é normal. Nos monócitos, a proporção de promonócitos estava reduzida (23,1%,14.4-33.1%) na SMDp e houve aumento na proporção de monócitos inflamatórios CD16+/monócitos totais, na DB (7,7%, 6.6-15.3%), nos EII (9,8%, 7.6-17.5%) e nas AA (29.1%, 26.6-35.6%). Houve redução da MFI CD36 dos monócitos na SMDp e na PG, e não nas DB, que tiveram diminuição de MFI CD33 e CD35. Nos monócitos de EII, houve redução de MFI HLADR e cMPO vs SMDp e DB. O setor eritróide era diminuído nas PG (5.0%, 2.4-9.8%), nos EII (5.7%, 3.9-6.9%) e na AA (2.2%, 0.2-9.7%). A MFI de CD36 eritróide era menor na SMDp e nos EII, sendo normal nas DB. A MFI CD117 nos eritroblastos foi superior nas PG frente à SMDp. Conclusão: Considerando a complexidade e os desafios inerentes ao diagnóstico das citopenias refratárias, especialmente na pediatria, é fundamental integrar ferramentas diagnósticas rápidas e sensíveis, como a CFM, para aprimorar o processo diagnóstico. Na MO de crianças, existem padrões imunofenotípicos distintos entre a SMDp, PG, DB, EII, AA e os controles, que podem contribuir futuramente para a criação de critérios objetivos para o diagnóstico diferencial das citopenias refratárias pediátricas por CFM.
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SN - 2531-1379
SN - 2531-1387
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