AVALIAÇÃO DO PERFIL FITOQUÍMICO E DO IC50 DA HEDERA HELIX EM CÉLULAS MONONUCLEARES DO SANGUE PERIFÉRICO
- 1Universidade Federal do Triângulo Mineiro (UFTM), Uberaba, MG, Brasil
Abstract
Introdução: Pesquisas recentes apontam que o extrato de Hedera helix possui atividade citotóxica e antiproliferativa, demonstrando potencial terapêutico antitumoral. Objetivo: Analisar o perfil fitoquímico e determinar o Índice de Citotoxicidade (IC50) do extrato de Hedera helix, bem como o efeito na produção de proteínas citolíticas por linfócitos citotóxicos. Metodologia: Foi realizado o screening fitoquímico do extrato comercial (FSL Farma, Brasil) da Hedera helix na concentração 500 mg/mL para identificação de alcalóides, cumarinas, taninos, fenol total, flavonol, flavona e flavonona. Para a determinação do IC50 foram adicionadas 1×105 células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de 05 indivíduos saudáveis em placas de 96 poços, que foram tratadas com o extrato por 24 horas, nas concentrações 200 mg/mL, 100 mg/mL, 50 mg/mL, 25 mg/mL e 12,5 mg/mL, em quadruplicatas. O IC50 foi determinado por vermelho neutro e a quantificação da expressão de proteínas perforina e granzima B foi realizada por citometria de fluxo. Resultados: A caracterização fitoquímica evidenciou a presença de alcalóides e taninos, com predominância de flavonas, seguidas pelos fenóis totais e em menor concentração, pelas flavanonas. Quanto à determinação do IC50, foi obtido o valor de 50,91 mg/mL (R²=0,9502) do extrato de Hedera helix em PBMCs. Com base nesse resultado, foi selecionada a concentração de 50 mg/mL para os ensaios subsequentes de quantificação de perforina e granzima B nas subpopulações de linfócitos T CD8⁺ e células NK. Na quantificação da perforina e granzima B não foi possível obter resultados significativos no citômetro de fluxo devido a autofluorescência, gerada pela presença de alcaloides e flavonoides. Discussão: A caracterização fitoquímica do extrato da Hedera helix permitiu compreender a variabilidade dos seus compostos bioativos identificados neste estudo, ressaltando a importância dos seus efeitos biológicos. Os alcalóides e taninos encontrados na análise qualitativa, são importantes metabólitos com propriedades anti-inflamatórias, antioxidantes e antibacterianas. A predominância de flavonas foi significativa, essa classe é frequentemente associada à atividade antiviral e antiproliferativa, podendo modular tanto vias pró-inflamatórias quanto mecanismo de apoptose celular. Já as flavanonas são relacionadas aos efeitos antioxidantes e imunorreguladores. Conclusão: O extrato da Hedera helix evidenciou a presença de compostos bioativos como alcaloides, taninos, flavonas, fenóis totais e flavanonas com potencial citotóxico e imunomodulador. Também foi possível concluir que a citometria de fluxo sofre grande interferência por compostos fitoquímicos, o que inviabiliza o uso da técnica para determinadas análises com compostos fitoterápicos. Os achados deste estudo contribuem para futuras investigações na utilização da Hedera helix no contexto da imunomodulação celular, contribuindo para o desenvolvimento de terapias naturais.
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AB - Introdução: Pesquisas recentes apontam que o extrato de Hedera helix possui atividade citotóxica e antiproliferativa, demonstrando potencial terapêutico antitumoral. Objetivo: Analisar o perfil fitoquímico e determinar o Índice de Citotoxicidade (IC50) do extrato de Hedera helix, bem como o efeito na produção de proteínas citolíticas por linfócitos citotóxicos. Metodologia: Foi realizado o screening fitoquímico do extrato comercial (FSL Farma, Brasil) da Hedera helix na concentração 500 mg/mL para identificação de alcalóides, cumarinas, taninos, fenol total, flavonol, flavona e flavonona. Para a determinação do IC50 foram adicionadas 1×105 células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de 05 indivíduos saudáveis em placas de 96 poços, que foram tratadas com o extrato por 24 horas, nas concentrações 200 mg/mL, 100 mg/mL, 50 mg/mL, 25 mg/mL e 12,5 mg/mL, em quadruplicatas. O IC50 foi determinado por vermelho neutro e a quantificação da expressão de proteínas perforina e granzima B foi realizada por citometria de fluxo. Resultados: A caracterização fitoquímica evidenciou a presença de alcalóides e taninos, com predominância de flavonas, seguidas pelos fenóis totais e em menor concentração, pelas flavanonas. Quanto à determinação do IC50, foi obtido o valor de 50,91 mg/mL (R²=0,9502) do extrato de Hedera helix em PBMCs. Com base nesse resultado, foi selecionada a concentração de 50 mg/mL para os ensaios subsequentes de quantificação de perforina e granzima B nas subpopulações de linfócitos T CD8⁺ e células NK. Na quantificação da perforina e granzima B não foi possível obter resultados significativos no citômetro de fluxo devido a autofluorescência, gerada pela presença de alcaloides e flavonoides. Discussão: A caracterização fitoquímica do extrato da Hedera helix permitiu compreender a variabilidade dos seus compostos bioativos identificados neste estudo, ressaltando a importância dos seus efeitos biológicos. Os alcalóides e taninos encontrados na análise qualitativa, são importantes metabólitos com propriedades anti-inflamatórias, antioxidantes e antibacterianas. A predominância de flavonas foi significativa, essa classe é frequentemente associada à atividade antiviral e antiproliferativa, podendo modular tanto vias pró-inflamatórias quanto mecanismo de apoptose celular. Já as flavanonas são relacionadas aos efeitos antioxidantes e imunorreguladores. Conclusão: O extrato da Hedera helix evidenciou a presença de compostos bioativos como alcaloides, taninos, flavonas, fenóis totais e flavanonas com potencial citotóxico e imunomodulador. Também foi possível concluir que a citometria de fluxo sofre grande interferência por compostos fitoquímicos, o que inviabiliza o uso da técnica para determinadas análises com compostos fitoterápicos. Os achados deste estudo contribuem para futuras investigações na utilização da Hedera helix no contexto da imunomodulação celular, contribuindo para o desenvolvimento de terapias naturais.
SN - 2531-1379
SN - 2531-1387
ER -