IMPLEMENTAÇÃO DO FLAER NA AVALIAÇÃO DA DOENÇA RESIDUAL MENSURÁVEL DA LEUCEMIA PROMIELOCÍTICA AGUDA POR CITOMETRIA DE FLUXO MULTIPARAMÉTRICA
- 1Hospital Erasto Gaertner, Curitiba, PR, Brasil
Abstract
Introdução: A citometria de fluxo multiparamétrica (CFM) desempenha papel fundamental no diagnóstico, na caracterização imunofenotípica e na avaliação da doença residual mensurável (DRM) das leucemias agudas, devido à elevada sensibilidade e rápida obtenção dos resultados. Na leucemia promielocítica aguda (LPA), considerada uma emergência onco-hematológica, a identificação da doença residual permanece desafiadora, especialmente pela necessidade de diferenciar promielócitos leucêmicos de precursores mieloides regenerativos. A LPA é caracterizada pela fusão gênica PML::RARA decorrente da t(15;17), e apresenta imunofenótipo típico com ausência de CD16. O FLAER (fluorescent aerolysin), reagente que se liga especificamente às âncoras de glicosilfosfatidilinositol (GPI), é amplamente utilizado no diagnóstico da hemoglobinúria paroxística noturna. Estudos recentes sugerem que sua incorporação aos painéis de DRM da LPA pode auxiliar na discriminação entre populações mieloides normais e células leucêmicas residuais. Objetivo: Avaliar a implementação do FLAER em um painel de CFM para DRM da LPA e descrever sua aplicabilidade como marcador complementar na identificação de promielócitos leucêmicos residuais. Material e métodos: Foram analisadas 5 amostras de pacientes com LPA em acompanhamento pós-tratamento para avaliação de DRM por CFM e 5 amostras de medula óssea normais. As aquisições foram realizadas em citômetro FACSLyric de 12 cores (BD Biosciences - EUA) e analisadas no software Infinicyt (Espanha). A estratégia baseou-se na identificação do imunofenótipo associado à leucemia (LAIP), utilizando painéis validados pelo consórcio EuroFlow para leucemia mieloide aguda. Ao protocolo institucional foi incorporado um tubo adicional contendo FLAER, CD33, CD34, CD117, CD45 e HLA-DR, empregado como marcador complementar na caracterização das populações mieloides e na diferenciação entre células regenerativas e populações residuais. Resultados: As populações mieloides normais apresentaram expressão preservada de FLAER, enquanto os promielócitos leucêmicos permaneceram FLAER negativos. Nos casos com DRM positiva, a população residual manteve imunofenótipo compatível com o observado ao diagnóstico, sendo a ausência de expressão de FLAER um parâmetro adicional para a segregação entre células mieloides regenerativas e células leucêmicas residuais durante a análise multiparamétrica. A inclusão do FLAER mostrou potencial para aumentar a confiança na interpretação imunofenotípica, principalmente em situações de difícil distinção entre regeneração medular e persistência da doença. Discussão e conclusão: A avaliação da DRM na LPA por CFM deve ser interpretada em conjunto com os achados citogenéticos e moleculares, especialmente a pesquisa do transcrito PML::RARA. Entretanto, a rapidez da CFM e sua capacidade de caracterizar imunofenotipicamente as populações celulares tornam essa metodologia indispensável no acompanhamento desses pacientes. A incorporação do FLAER ao painel de DRM mostrou-se uma estratégia complementar promissora, fornecendo um marcador adicional para diferenciação entre populações mieloides normais e promielócitos leucêmicos residuais e aumentando a robustez da interpretação imunofenotípica.
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RIS
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TI - IMPLEMENTAÇÃO DO FLAER NA AVALIAÇÃO DA DOENÇA RESIDUAL MENSURÁVEL DA LEUCEMIA PROMIELOCÍTICA AGUDA POR CITOMETRIA DE FLUXO MULTIPARAMÉTRICA
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AU - Miriam Perlingeiro BELTRAME
PY - 2026
DA - 2026/10/23
JO - Hematology, Transfusion and Cell Therapy
DO - 10.1016/j.htct.2026.107425
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AB - Introdução: A citometria de fluxo multiparamétrica (CFM) desempenha papel fundamental no diagnóstico, na caracterização imunofenotípica e na avaliação da doença residual mensurável (DRM) das leucemias agudas, devido à elevada sensibilidade e rápida obtenção dos resultados. Na leucemia promielocítica aguda (LPA), considerada uma emergência onco-hematológica, a identificação da doença residual permanece desafiadora, especialmente pela necessidade de diferenciar promielócitos leucêmicos de precursores mieloides regenerativos. A LPA é caracterizada pela fusão gênica PML::RARA decorrente da t(15;17), e apresenta imunofenótipo típico com ausência de CD16. O FLAER (fluorescent aerolysin), reagente que se liga especificamente às âncoras de glicosilfosfatidilinositol (GPI), é amplamente utilizado no diagnóstico da hemoglobinúria paroxística noturna. Estudos recentes sugerem que sua incorporação aos painéis de DRM da LPA pode auxiliar na discriminação entre populações mieloides normais e células leucêmicas residuais. Objetivo: Avaliar a implementação do FLAER em um painel de CFM para DRM da LPA e descrever sua aplicabilidade como marcador complementar na identificação de promielócitos leucêmicos residuais. Material e métodos: Foram analisadas 5 amostras de pacientes com LPA em acompanhamento pós-tratamento para avaliação de DRM por CFM e 5 amostras de medula óssea normais. As aquisições foram realizadas em citômetro FACSLyric de 12 cores (BD Biosciences - EUA) e analisadas no software Infinicyt (Espanha). A estratégia baseou-se na identificação do imunofenótipo associado à leucemia (LAIP), utilizando painéis validados pelo consórcio EuroFlow para leucemia mieloide aguda. Ao protocolo institucional foi incorporado um tubo adicional contendo FLAER, CD33, CD34, CD117, CD45 e HLA-DR, empregado como marcador complementar na caracterização das populações mieloides e na diferenciação entre células regenerativas e populações residuais. Resultados: As populações mieloides normais apresentaram expressão preservada de FLAER, enquanto os promielócitos leucêmicos permaneceram FLAER negativos. Nos casos com DRM positiva, a população residual manteve imunofenótipo compatível com o observado ao diagnóstico, sendo a ausência de expressão de FLAER um parâmetro adicional para a segregação entre células mieloides regenerativas e células leucêmicas residuais durante a análise multiparamétrica. A inclusão do FLAER mostrou potencial para aumentar a confiança na interpretação imunofenotípica, principalmente em situações de difícil distinção entre regeneração medular e persistência da doença. Discussão e conclusão: A avaliação da DRM na LPA por CFM deve ser interpretada em conjunto com os achados citogenéticos e moleculares, especialmente a pesquisa do transcrito PML::RARA. Entretanto, a rapidez da CFM e sua capacidade de caracterizar imunofenotipicamente as populações celulares tornam essa metodologia indispensável no acompanhamento desses pacientes. A incorporação do FLAER ao painel de DRM mostrou-se uma estratégia complementar promissora, fornecendo um marcador adicional para diferenciação entre populações mieloides normais e promielócitos leucêmicos residuais e aumentando a robustez da interpretação imunofenotípica.
SN - 2531-1379
SN - 2531-1387
ER -